تقدير نسبة البروتين

بروتينات البلازما PLASMA PROTEN
تصنع بروتينات الدم جميعها بواسطة خلايا الكبد وهو المصنع الوحيد والأساسى لها فيما عدا الجلوبيلين (Globulin) فإنه يصنع فى خلايا الجهاز الشبكى الإندوثليومى0
ومن أشهر أمثلة بروتينات البلازما :-
( الألبيومين Albumin / الجلبيولين Globulin / الفيبرينوجين Fibrinogen / وبعض الإنزيمات و عوامل التجلط مثل Prothrombin )
س: أذكر بعض وظائف بروتينات البلازما؟
ج: 1- تحافظ على الضغط الأسموزى فى الجسم وبخاصة اللألبيومين
2- تساعد على حمل ونقل بعض المركبات مثل الحديد والنحاس والكالسيوم وبعض الهرمونات مثل الثيركسين
3- تعمل كأجسام مناعية للحفاظ على الجسم ضد الميكروبات المختلفة
4- تساعد على التأم الجروح وتكون الجلطة الدموية (الفيبرينوجين)
************************************************** *******
تقدير نسبة البروتينات الكلية فى البلازما
TOTAL PROTEN
النسبة الطبيعية فى البلازما:- من 8-6 dl/g
الطريقة هى طريقة بيرت {إختبار بيورت} Biuret
أساس الأختبار :-
تتفاعل أيونات النحاس مع الروابط الببتدية فى جزىء البروتين وتعطى لون بنفسجى يتأثر بزيادة ونقص نسبة البروتين
تركيب كاشف بيرت :-يحضر بإزابة 9جم من طرطارات (Tartarate)الصوديوم والبوتاسيوم فى 500مللتر من هيدروكسيد الصوديوم
5ر0 عيارى +3جم كبريتات نحاس +5جم أيوديد البوتاسيوم ويكمل الى لترمن هيدركسيد الصوديوم0
العينات المستخدمة : يمكن تقدير نسب البروتينات الكلية TOTAL PROTEN فى عينات البلازما{ بإستخدام}EDTA ولا يمكن ذلك فى السيرم لانه تستهلك بعض البروتينات فى عملية التجلط
المحاليل المستخدمة : {R1 Biuret Reagnt R2 PROTENS standard {8g/dl /
طريقة عمل الأختبار:
T S B
- 20μl - standard
20μl - - sampel
1mL 1mL 1mL -R1 Biuret Reagnt
Mix incubate for 10 min at20-25 ċ
the coulour is stable for 30 min
نقوم بتحضير ثلاثة أنابيب نظيفة جافة ونميزها بالرموز/ B / S / T /
- الأنبوبة B وهى الخاصة بمحلول البلانك
- الأنبوبة S وهى الخاصة بالمحلول القياسى
- الأنبوبة T وهى الخاصة بعينة الأختبار (السيرم أو البلازما)
***** نقوم بإضافة 20ميكرون من المحلول القياسى فىالأمبوبة S و20 ميكرون من العينة (سيرم) فى أمبوبة T ثم نقوم بوضع 1mL من محلول بيرت R1 Biuret Reagnt المعد سابقا فى الثلاث أنابيب نضع كل الأنابيب فى الحضانة عند 25-20 درجة مئوية لمدة 10 دقائق بعدها يثبت اللون / نقراء أو نقيس درجة اللون على جهاز قياس الألوان ونسجل القراءة ونقوم بعملي الحساب
الحساب : [Calculation [TOTAL PROTEN
نسبة البروتينات الكلية فى الدم (dl/g ) =
نسبةالبروتينات الكلية(g/dl) = قراءة العينة × 8
قراءة المحلول القياسى
{ 8/ هو تركيز المحلول القياسى }
س: قل ماتعرفه عن محلول بيوريت(Biuret Reagnt) أو أختبار بيوريت ؟
س :أذكر إستخدام واحد للمحاليل الآتية ( محلول بيوريت - محلول بندكت - حامض ثلاثى كلوريد الخليك T.C.A - البيكريك القلوى )


تقدير نسبةالألبيومين فى البلازما Albumin
س: ما هى الأسباب التى تؤدى الى نقص نسبة الألبيومينAlbumin فى الدم وما هى الآثار المترتبة عليها؟
ج : 1- القصور فى وظائف الكبد بصورة كبيرة يؤدى الى نقص فىنسبة الألبيومين لان الكبد هو المصنع الوحيد له فى الجسم ( لذا يعتبر نسبة الألبيومين فى الدم أو البلازما مؤشر على كفائة الكبد
2- القصور فى وظائف الكلى وتسرب الزلال(الألبيومين) فى البول هذا يؤدى الى نقص نسبة الألبيومين فى الدم أو البلازما (وقد يكون هذا مؤشر على عدم كفاءة الكلى لو استمر وجود الزلال فى البول
( ويترتب على نقص نسبة الألبيومين فى الجسم حدوث خلل فى الضغط الأسموزى للخلية ويحتفظ الجسم بكمية كبيرة من السوائل مما يؤدى الىحدوث تورم وخاصة فى القدمين والوجه واستسقاء فى منطقة البطن وهذا يظهر بوضوح فى حالات امراض الكبد المتأخرة)
النسبة الطبيعية :- من 5ر3 -5ر5 dl/g
فكرة الإختبار :- طريقة صبغة بروموكريسول الخضراء Bromocrosol Green تتحد صبغة بروموكريسول الخضراء مع الألبيومين لتكون مركب له لون أخضر تزداد كثافته فىالوسط الحامضى
العينات المستخدمة : يمكن تقدير نسب الألبيومين Albumin فى عينات السيرم أو البلازما { بإستخدام}EDTA Hأو هيبارين
المحاليل المستخدمة : [R1 Color Reagnt R2 Albumin standard [4g/dl /
طريقة عمل الأختبار:
T S B
- 10μl - standard
10μl - - sampel
1mL 1mL 1mL Color Reagant
Mix incubate for 5 min at20-25 ċ
the coulour is stable for 30 min
نقوم بتحضير ثلاثة أنابيب نظيفة جافة ونميزها بالرموز/ B / S / T /
- الأنبوبة B وهى الخاصة بمحلول البلانك
- الأنبوبة S وهى الخاصة بالمحلول القياسى
- الأنبوبة T وهى الخاصة بعينة الأختبار (السيرم)
***** نقوم بإضافة 10ميكرون من المحلول القياسى فىالأمبوبة S و10 ميكرون من العينة (سيرم) فى أمبوبة T ثم نقوم بوضع 1mL من محلول التلوين فى الثلاث أنابيبColor Reagant نضع كل الأنابيب فى حرارة الغرفة لمدة 5 د قائق يظهول اللون / نقراء أو نقيس درجة اللون على الجهاز مباشرتا ونقوم بعملية الحساب كما فى الخطوة التالية0
الحساب : Calculation
تركيزالألبيومين فى الدم (dl/g ) =
الألبيومين Albumin (g/dl) = قراءة العينة × 4
قراءة المحلول القياسى
( 4/ هو تركيز المحلول القياسى )
مستوى الجلوبيولين = نسبة البروتينات الكلية - نسبة الألبيومين
نسبة الألبيومين الى الجلبيولين = Albumin = A/G ratio
Globulin
الطبيعى بنسبة 1.4 -2.25

اتمنى ان اكون افدكم بمعلوماتي